The World of Words

Laporan Praktikum Biokimia Umum

Hari/tanggal : Selasa/19 Oktober 2010 Waktu : 08.00 – 11.00 WIB PJP : Waras Nurcholis,M.Si Asisten : 1. Resti Siti Muthmainah 2. Dian Apriliana

PROTEIN 2

KELOMPOK 10

Randi Hadianta (G34090020)

Yovita Sari (G34090028)

Kurrataa’yun (G34090105)

DEPARTEMEN BIOKIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

2010

 

______________________________________________________________________________________

PENDAHULUAN

Protein terdapat dalam semua jaringan hidup baik tumbuhan maupun hewan. Jaringan biji-bijian, daging tak berlemak, organ vital, kulit dan rambut mengandung protein dalam jumlah yang lebih besar daripada jaringan-jaringan berlemak. Semua molekul protein mengandung nitrogen dalam gabungan dengan karbon, hydrogen, dan oksigen. Banyak juga yang mengandung belerang dan fosforus, dan beberapa mengandung besi, mangan, tembaga dan iod. Molekul protein sangatlah besar, bobot molekulnya berjangka dari 10.000 sampai beberapa juta sma. Asam amino adalah senyawaan dengan molekul yang mengandung baik baik gugus fungsional amino (-NH₂) maupun karboksil (-CO₂H). meskipun ratusan asam ini telah disintesis, hanya 20 yang telah diperoleh dengan hidrolisis protein. Sifat-sifat protein protein beraneka ragam (Keenan, Kleinfelter, Wood 1992).

Pemahaman aspek-aspek struktural protein sangatlah penting untuk analisis komponen biokimia proses-proses hidup, serta untuk pengertian peristiwa-peristiwa biologis yang terjadi dalam tubuh pada peringkat molekul (Montgomery 1993).

Molekul protein sederhana adalah molekul berantai panjang yang terbentuk oleh penggabungan ratusan atau ribuan molekul asam amino. Penggabungan itu berkat ikatan-ikatan yang masing-masing dapat dianggap sebagai berasal dari suatu gugus –NH₂ dan –CO₂H dengan tereliminasinya sebuah molekul air. Ikatan penting tersebut disebut ikatan peptida (Keenan et al.1992).

TUJUAN

Praktikum dengan judul Protein ini bertujuan untuk mengamati sifat sekaligus menganalisis struktur asam amino dan protein melalui uji-uji kualitatif pada larutan albumin, gelatin, kasein, pepton, dan fenol. Selain itu, praktikum ini bertujuan untuk mempelajari beberapa reaksi uji terhadap asam amino dan protein, yaitu uji Millon, uji Hopkins-Cole, uji Ninhidrin, Uji Xantroproteat, uji belerang, dan uji biuret.

ALAT DAN BAHAN

Praktikum kali ini digunakan alat dan bahan yang cukup sederhana. Alat-alat yang digunakan adalah: tabung reaksi, bulb, pipet ukur 5 mL, pipet tetes, penangas air, dan gegep. Sementara bahan-bahan yang dibutuhkan adalah larutan albumin 2%, larutan gelatin 2%, larutan kasein 2%, larutan pepton 2%, larutan fenol 2%, pereaksi millon, pereaksi Hopkins-Cole, pereaksi Ninhidrin, pereaksi Xantoproteat, larutan NaOH 10%, larutan Pb-asetat 5%, dan larutan CuSO₄.

 

HASIL PENGAMATAN

Tabel 1. Pengamatan Uji Millon

Larutan Uji	Pengamatan	Warna
Albumin 2%	+	Merah muda
Gelatin 2%	-	Putih
Kasein 2%	++	Merah muda
Pepton 2%	-	Putih
Fenol 2%	+	Agak putih

Ket :

+ : Larutan uji mengandung tirosin - : Larutan uji tidak mengandung tirosin

Gambar 1. Uji Millon larutan Albumin, Gelatin, Kasein, Pepton, dan Fenol (berturut-turut dari kiri ke kanan)

 

Tabel 2. Pengamatan Uji Hopkins – Cole

Larutan Uji	Pengamatan	Warna
Albumin 2%	+++	Cincin ungu pekat
Gelatin 2%	+	Cincin agak ungu
Kasein 2%	++	Cincin ungu muda
Pepton 2%	++	Cincin ungu muda

Ket :

+ : Larutan uji mengandung triptofan - : Larutan uji tidak mengandung triptofan

 

Gambar 2. Uji Hopkins-Cole larutan albumin, gelatin, kasein, dan pepton (berturut-turut dati kiri ke kanan)

 

Tabel 3. Pengamatan Uji Ninhidrin

Larutan Uji	Pengamatan	Warna
Albumin 2%	+	Putih kuning
Gelatin 2%	+++	Ungu pekat
Kasein 2%	++	Kuning
Pepton 2%	++	Ungu Muda

Ket :

+ : Larutan uji mengandung asam amino - : Larutan uji tidak mengandung asam amino

 

Gambar 3. Uji Ninhidrin larutan albumin, gelatin, kasein, dan pepton (berturut-turut dati kiri ke kanan)

 

Tabel 4. Pengamatan Uji Belerang

Larutan Uji	Pengamatan	Warna
Albumin 2%	+	Hitam
Gelatin 2%	-	Putih
Kasein 2%	-	Putih
Pepton 2%	-	Putih

Ket :

+ : Larutan uji mengandung asam amino sistein - : Larutan uji tidak mengandung asam amino sistein

 

Gambar 4. Uji Belerang larutan albumin, gelatin, kasein, dan pepton (berturut-turut dati kiri ke kanan)

 

Tabel 5. Pengamatan Uji Xantoproteat

Larutan Uji	Pengamatan	Warna
Albumin 2%	++	Kuning menggumpal
Gelatin 2%	+	Kuning agak keruh
Kasein 2%	++	Kuning agak pekat
Pepton 2%	++	Kuning bening
Fenol 2%	+	Jingga pekat

Ket :

+ : Larutan uji mengandung asam amino inti benzena - : Larutan uji tidak mengandung asam amino inti benzena

 

Gambar 5. Uji Ninhidrin larutan albumin, gelatin, kasein, pepton, dan fenol(berturut-turut dari kiri ke kanan)

 

Tabel 6. Pengamatan Uji Biuret

Larutan Uji	Pengamatan	Warna
Albumin 2%	+	Ungu
Gelatin 2%	-	Putih
Kasein 2%	-	Putih
Pepton 2%	-	Putih
Fenol 2%	-	Putih

Ket :

+ : Terjadi kompleks Cu2+ dengan peptida - : Tidak terjadi kompleks Cu2+ dengan peptida

Gambar 6. Uji Ninhidrin larutan albumin, gelatin, kasein, pepton, dan fenol(berturut-turut dari kiri ke kanan)

 

PEMBAHASAN

Sejumlah asam amino pada hasil penelitian (perlakuan terbaik) terdiri atas asam amino essensial maupun non essensial. Asam-asam amino tertentu seperti triptofan, arginin, trisin, fenilalanin, glutamin, alanin, treonin dan prolin dapat merangsang proses sintesa albumin. Albumin pada manusia terutama banyak mengandung asam aspartat dan glutamat dan sangat sedikit triptofan (Sulistiyati 2008).

Hasil uji Millon menghasilkan larutan albumin, kasein, dan fenol mengalami perubahan warna menjadi kemerahan (gambar 1). Perubahan tersebut membuktikan bahwa albumin, kasein dan fenol mengandung tirosin. Sementara gelatin dan pepton tidak terlihat mengalami perubahan warna, sehingga gelatin dan pepton tidak mengandung tirosin.

Uji Hopkins-Cole bereaksi positif pada semua larutan yang diujikan, yaitu albumin, gelatin, kasein, dan pepton. Hal tersebut membuktikan bahwa keempat larutan tersebut mengandung triptofan. Albumin mengandung triptofan paling banyak, hal ini dibuktikan dengan cincin ungu yang terbentuk paling pekat di antara keempat larutan yang diuji (gambar 2).

Uji Ninhidrin merupakan uji protein yang spesifik kepada larutan yang mengandung gugus amino dan gugus karboksil. Hasil uji didapatkan semua larutan mengandung gugus amino dan gugus karboksil dengan perubahan larutan warna menjadi ungu dan beberapa menjadi kuning (gambar 3). Albumin memiliki perubahan warna yang tidak pekat. Sehingga, albumin memiliki paling sedikit gugus amino dan gugus karboksil.

Uji Xantoproteat spesifik pada pendeteksi inti benzena. Hasil uji menghasilkan reaksi positif pada semua larutan yang diuji, yaitu albumin, gelatin, kasein, pepton dan fenol, sehingga semua larutan memiliki inti benzene. Pada albumin terlihat gumpalan protein yang mengalami denaturasi akibat pemanasan sekaligus pendinginan. Hal tersebut juga memperkuat bukti bahwa albumin mengandung protein yang mengandung ikatan hidrogen.

Uji Belerang dilakukan pada larutan albumin, kasein, gelatin, dan pepton. Hasil uji menunjukkan hanya albumin yang bereaksi positif dengan berubahnya larutan menjadi hitam (gambar 5). Uji belerang merupakan uji yang spesifik dalam mendeteksi sistein. Sehingga, dari keempat larutan hanya albumin yang mengandung sistein.

Sama halnya dengan uji biuret, hasil uji biuret menghasilkan reaksi yang positif hanya pada larutan albumin. Uji biuret spesifik mendeteksi larutan yang mengandung asam amino histidin, serin, dan treonin. Larutan gelatin, kasein, pepton, dan fenol tidak bereaksi positif dikarenakan keempat larutan tersebut hanya mengandung satu jenis asam amino yang terdeteksi biuret.

KESIMPULAN

Hasil uji Millon menunjukkan bahwa albumin, kasein dan fenol mengandung tirosin sementara gelatin dan pepton tidak mengandung tirosin. Uji Hopkins-Cole bereaksi positif pada semua larutan yang diujikan, yaitu albumin, gelatin, kasein, dan pepton. Uji Ninhidrin menunjukkan bahwa albumin memiliki paling sedikit gugus amino dan gugus karboksil. Uji Xantoproteat menunjukkan bahwa albumin mengandung protein yang mengandung ikatan hidrogen. Pada uji Belerang dilakukan pada larutan albumin, kasein, gelatin, dan pepton. Hasil uji menunjukkan hanya albumin yang bereaksi positif. Hal yang sama pada hasil uji biuret menghasilkan reaksi yang positif hanya pada larutan albumin.